現(xiàn)在臨床PCR實驗室使用的試劑大部分都是各生產(chǎn)企業(yè)提供的商品化的試劑盒，那么試劑質(zhì)量的好壞直接決定了實驗結(jié)果的好壞，而不同廠家試劑的性能、質(zhì)量和價格千差萬別，如何選擇一款合適的試劑對每個PCR實驗室都至關(guān)重要，一般來說，選擇試劑主要從以下幾個方面進行評價：

1、重復(fù)性  

首先，試劑檢測結(jié)果的重復(fù)性直接展現(xiàn)了試劑的方法學(xué)及其質(zhì)量的好壞，是評價試劑好壞最明顯、最直接的指標(biāo)。  

其次，我們在此說的試劑重復(fù)性是指對原始樣本檢測的重復(fù)性，而不是對某一個樣本提取的核酸進行重復(fù)性的檢測和評價。  

最后，試劑的重復(fù)性對于療效檢測、用藥指導(dǎo)有著重大的意義，一個重復(fù)性好的試劑，往往能夠在病人的抗病毒治療過程中，給醫(yī)生和病人提供最直接、最可靠的數(shù)據(jù)，讓醫(yī)生和病人對疾病進展有更清楚的認識，從而制定合理的治療方案，實現(xiàn)更好的治療效果。

2、靈敏度  

一個試劑的靈敏度往往能夠體現(xiàn)該試劑的技術(shù)水平和先進程度，同時對于臨床病癥的監(jiān)測有著舉足輕重的意義。以乙肝為例來說，我國的乙肝復(fù)發(fā)率遠遠大于發(fā)達國家，同時由乙肝病毒感染轉(zhuǎn)換為慢性肝炎、肝硬化、肝癌的患者也居世界前列，這很大程度上與對低載量病毒監(jiān)控的嚴重不足有關(guān)。美國肝病學(xué)會專家組就提出，對乙肝抗病毒治療過程中，HBV DNA的最低監(jiān)測點應(yīng)設(shè)置為10IU/ml，而歐洲和亞太肝病學(xué)也指出HBV DNA病毒載量應(yīng)該盡可能小于10IU/ml。這都足以證明，高靈敏度對于用藥治療、病程監(jiān)控等起著巨大的作用，靈敏度越高，對于疾病的監(jiān)控效果更好，對于確定治療的終點，具有積極的指導(dǎo)作用。

3、定量準確性  

對于臨床檢測中定量項目來說，試劑盒定量的準確性是非常重要的，也是評價定量試劑盒的一個重要指標(biāo)之一。衛(wèi)生部每年都會有2次全國性的室間質(zhì)評，通過質(zhì)評結(jié)果可以很好的看出試劑盒定量的準確性。  但往往很多時候，實驗室在選擇試劑的時候都偏重與過去的試劑盒比較定量結(jié)果的差異，并以過去的試劑盒定值作為標(biāo)準來參考和評價一種新試劑，其實這種方法不完全可取。不過可以通過同時檢測衛(wèi)生部的質(zhì)控品來進行比較，這樣才使得兩種試劑在同一客觀標(biāo)準上進行PK，得到合理公平的評價。  

同時，要驗證一個試劑的定量是否準確，我們可以采用一個高濃度樣本，用陰性血清依次進行10倍梯度的稀釋，然后選取多家試劑公司的產(chǎn)品進行同步檢測PK，考察各公司試劑對樣本定值的實際值與理論值的差異，即可判斷各公司試劑定量準確與否。 

4、有無內(nèi)標(biāo)監(jiān)測  

內(nèi)標(biāo)的一個最主要的作用就是控制假陰性結(jié)果的發(fā)生，但在國內(nèi)臨床檢測中往往被忽視了，這主要與兩個方面有關(guān)，一個是之前國內(nèi)使用的很多熒光定量PCR儀均為單通道的儀器，無法進行多色熒光的檢測；國內(nèi)外PCR行業(yè)對內(nèi)標(biāo)的研究已不是一個新興課題，目前國內(nèi)PCR行業(yè)能把內(nèi)標(biāo)做得非常好的科研單位或商業(yè)化的PCR試劑廠家寥寥無幾，這正體現(xiàn)了這一技術(shù)的難度。  

在臨床檢測中，內(nèi)標(biāo)的作用非常重要。在臨床檢測過程中，怎么做到每一個陰性結(jié)果均為真正的陰性結(jié)果，從而杜絕因擴增抑制而出現(xiàn)的假陰性結(jié)果呢？內(nèi)標(biāo)的加入就能夠很好的防止假陰性結(jié)果了，加入我們做了一個樣本，它的目標(biāo)檢測熒光為陰性，內(nèi)標(biāo)檢測熒光也為陰性，那么這個樣本的擴增則受到了抑制，該陰性結(jié)果為假陰性，我們必須對該樣本進行復(fù)檢。如果試劑沒有內(nèi)標(biāo)的話，我們則不能很好的判斷該結(jié)果是否正常？是否可以發(fā)報告？在發(fā)報告時，我們無法保證發(fā)出去的結(jié)果百分之百的準確；內(nèi)標(biāo)的加入，就可以解決我們這方面的煩惱。目前，衛(wèi)生部的專家也在大力推崇內(nèi)標(biāo)的重要性，也是為了保證檢驗結(jié)果的準確可靠。

5、線性定量范圍  

試劑盒的線性定量范圍指的是試劑盒最低檢測下限和最高檢測上限之間的范圍，范圍越寬說明試劑盒性能越好。

6、UNG酶防污染體系  

PCR反應(yīng)過程中， 1個拷貝的DNA經(jīng)過30個循環(huán)后，可以增長到10億個拷貝的產(chǎn)物DNA， 極微量的PCR 產(chǎn)物污染，就可能造成假陽性，因而這是一個值得特別重視的問題。尿嘧啶糖苷酶（UNG）法：將PCR 產(chǎn)物中的dT用dU 代替。這種dU 化的PCR 產(chǎn)物與UNG 一起孵育，因UNG 可裂解尿嘧啶堿基和糖磷酸骨架間的N-糖基鍵，可除去dU 而阻止TaqDNA 聚合酶的延伸，從而失去被再擴增的能力。UNG 對不含dU 的模板無任何影響，UNG 可從單或雙鏈DNA 中消除尿嘧啶，而對RNA 中的尿嘧啶和單一尿嘧啶分子則無任何作用。  

此外，試劑的穩(wěn)定性、批間差、溯源性（是否溯源于WHO國際標(biāo)準品）等也都是考察一款試劑盒質(zhì)量重要指標(biāo)。